В.Н. Анисимов

"Молекулярные и физиологические механизмы старения"

1.6. Гены долголетия у мышей

 

Дело в том, что исчезла граница
между вечностью и веществом,
и на что неземная зеница,
если вензеля нет ни на чем?

Владимир Набоков

Применение методов генной инженерии позволило получить линии мышей с увеличенной продолжительностью жизни. Гомозиготные мыши с "выключенным" геном рецептора гормона роста (GHR-/-) живут значительно дольше, чем гетерозиготные (GHR+/-) животные или мыши дикого типа (GHR+/+) {Kopchick, Laron, 1999; Coschigano et al., 2000). У мышей GHR-/- наблюдается замедление роста, пропорциональная карликовость, уменьшение длины костей и содержания костных минералов, отсутствие рецептора гормона роста и ГР-связывающего белка, значительное уменьшение содержания в крови инсулинподобного фактора роста 1 и связывающего его белка-3, и увеличение в сыворотке крови концентрации ГР.

Карликовые мыши Эймса являются гомозиготными аутосомально-рецессивными мутантами, несущими единичные точечные мутации в гене Prophet pit-1 и живут на 50-64% дольше (самцы и самки соответственно), чем "дикий" тип (Brown-Borg et al., 1996; Brown-Borg, Rakoczy, 2000). Эта модель - один из первых примеров способности единичного гена значительно продлевать жизнь у млекопитающих- У этих мышей снижен уровень пролактина, тиреоидстимулирующего гормона (ТСГ), гормона роста (ГР), инсулин подобного фактора роста 1 (IGF-1) и инсулина в крови, повышена чувствительность к инсулину и понижена температура тела (Bartke et al., 2001). Как самцы, так и самки карликовых мышей бесплодны, у них выражена иммунодепрессия. Показано, что у этих мышей в печени снижен уровень глютатиона и аскорбиновой кислоты и увеличена активность каталазы по сравнению с контролем, что проявляется большей устойчивостью к окислительному стрессу (Mattison, 2000). Карликовые мыши Снелл (Snell) у которых имеется мутация в гене Pit1 (гипофизарно-специфичный транскрипционный фактор 1), также живут много дольше, чем нормальные мыши, что связывают с дефицитом у них продукции гормона роста (Flurkey et al., 2001).

У самок гетерозиготных мышей Igf1r+/- с частично нокаутированным геном рецептора IGF-1 наблюдали увеличение средней продолжительности жизни на 33 % по сравнению с самками дикого типа (р<0.001), тогда как у самцов - лишь на 16 %. У этих мышей не наблюдалось карликовости, основной обмен, температура тела, потребление корма, физическая активность и фертильность у них не отличались от контроля. Отмечена большая устойчивость этих мышей к окислительному стрессу по сравнению с контролем (Igf1r+/+) (Holzenberger et al., 2003).

На рис. 4 представлены схемы эволюционно консервативных систем передачи сигнала инсулина у нематоды, плодовых мух и млекопитающих.

Мутация адапторного гена, кодирующего белок p66shc у мышей, привела к развитию устойчивости к вызванному паракватом окислительному стрессу, индуцирующему продукцию анионов супероксида, и увеличению продолжительности жизни животных на 30% (Migliaccio et ah, 1999). Этот ген, кодирующий белок p66shc, фосфорилируется по тирозину в ответ на активацию рецепторов фактора роста и образует стабильные комплексы с Grb2 - адапторным белком для ras-зависимого SOS-фактора. Белок p66shc представляет собой вариант соединенных белков p52shc и р46shc и является цитоплазматическим сигнальным трансдуктором в процессе передачи митогенных сигналов от активированных рецепторов к Ras. Предполагается, что p66shc вовлечен в феноптоз, то есть запрограммированную гибель организма, обусловленную массовым апоптозом в жизненно важных органах в результате воздействия активных форм кислорода (Skulachev, 2000).

Рис. 4 Схема передачи сигнала инсулина у нематоды, плодовых мух и млекопитающих.

 

Трансгенные мыши со встроенным геном -MUPA, который индуцирует в головном мозге продукцию мРНК, кодирующую урокиназу активатора плазминогена, потребляют на 20% меньше корма и живут на 20% дольше мышей дикого типа. Эти мыши имели значительно сниженную температуру тела и уменьшение уровня котикостерона в плазме в старческом возрасте (Miskin et al., 1999).

Таким образом, как у нематод и дрозофил, так и у мышей выявлено достаточно большое число генов, которые ассоциированы с долголетием (табл. 6).

Таблица 6


Генетические модификации, увеличивающие продолжительность жизни мышей
 

Мутация, ген Продукт гена, функция Тип мутации Изменение продолжительности жизни, %
 
Авторы
Ргор-1 Гипофизарно-специфичный транскрнпцнонный фактор
 
Аутосомально-
рецессивный
+65 (самки)
+50 (самцы)
Brown-Borg et al., 1996
Pit-1 Гипофизарно-специфичный транскрипционный фактор 1 » +45 Flurkey et al., 2002
Grh+ Рецептор гормона роста Нокаут +25 Coschigano et al., 2000
Igf1r+/- Рецептор ICF-1 Частичный нокаут +33 (самки)
+16 (самцы)
Holzenberger et al., 2003
FIRKO Рецептор инсулина в
адипоцитах
 
Нокаут +16 Blucbcr et al., 2003
p66shc-/- Адапторный белок окислительного стресса » +30 Migliaccio et al., 1999
Trd Тиоредоксин; восстанавливает окисленные
группы в белке
Суперэкспрессия +30 Mitsui et al., 2002
MGTM Метилгуонин-метилтрансфераза; репарация ДНК, алкилированной по О6-гуанину » Увеличивает
выживаемость
Qin el al., 2000
-MUPA Активатор плазминогена » +20 Miskin et al., 1999

 


Дизайн сайта разработан KN Graphics